Мазурова Е.А., Сафрай А.Е. ВОЗМОЖНОСТИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ НА МАТЕРИАЛЕ СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКИХ АУТОПСИЙ

Ленинградская область

Распространенность ВИЧ-инфекции приобретает широкие масштабы во всех регионах РФ. С 1996 г. случаи смерти от ВИЧ-инфекции зарегистрированы в Северо-Западном регионе РФ.

Клинические проявления ВИЧ-инфекции (стадия СПИДа) проявляются далеко не во всех случаях и нередко (на ранних стадиях) выражены слабо. В подавляющем числе случаев информация о наличии ВИЧ-инфекции на момент судебно-медицинского исследования трупа отсутствует.

В связи с тем, что судебно-медицинские эксперты в своей практике часто встречаются со случаями насильственной смерти лиц, относящихся к группам риска по ВИЧ-инфекции, а также со случаями скоропостижной смерти лиц молодого возраста от заболеваний инфекционного происхождения, посмертная лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции в бюро судебно-медицинской экспертизы становится необходимой.

Помимо этого, литературные данные показывают, что возможно определение антител к вирусу ВИЧ в сухих пятнах крови, в том числе при их длительном архивировании (до 12 лет).

Целями нашей работы было: показать перспективы посмертной диагностики ВИЧ-инфекции на трупном материале и выделить категорию трупов, где данный вид диагностики является обязательным, оценить возможности применения детекции антител к ВИЧ в сухих пятнах крови на вещественных доказательствах.

Для достижения указанной цели мы решали следующие задачи: 1.

Определить частоту встречаемости ВИЧ-инфицирования в определенных группах риска среди материала судебно-медицинских вскрытий. 2.

Установить категорию вскрытий, при которых ВИЧ-инфицирование встречается с наибольшей частотой. 3.

Определить группу заболеваний, выявляемых при судебно- медицинских исследованиях трупов у ВИЧ-инфицированных. 4.

Оценить возможность детекции антител к ВИЧ в сухих пятнах крови. 5.

Оценить сохранность антител в образцах высушенной крови.

В качестве материала для исследований мы использовали образцы жидкой крови и крови, высушенной на марле от трупов лиц, исследованных на протяжении 3 месяцев в 2 районных судебно-медицинских отделениях

Ленинградской области от отравлений наркотическими препаратами, от комбинированных отравлений этиловым спиртом и наркотиками, в случаях смерти от различных причин лиц, ранее употреблявших наркотики, в случаях наступления смерти лиц в возрасте от 18 до 50 лет от туберкулеза, пневмонии, гепатитов, а также при наличии сведений о прижизненном ВИЧ-инфицировании и во всех случаях убийств. Дополнительно исследовался архивный материал за 4 года высушенной на марле трупной крови с лабораторно подтвержденном ВИЧ- инфицированием .

Установление наличия антител в вирусу иммунодефицита человека производилось с помощью метода иммуноферментного анализа с помощью тест- системы «КомбиБест-ВИЧ-1,2 АГ/АТ» отечественного производства, широко применяемой в клинических диагностических лабораториях для серологического исследования сыворотки или плазмы крови человека на присутствие антител к ВИЧ первого и второго типов и структурного белка р 24 ВИЧ. В основе реакции - рекомбинантные антигены ВИЧ 1 и ВИЧ 2 и антитела к ядерному антигену р 24 ВИЧ1, иммобилизированные на поверхности лунок планшета и входящие в состав конъюгатов. Фотометрическая регистрация результатов осуществлялась в одноволновом режиме (фильтр 450) на аппарате «Automated Mikroplate Reader» (модель БЬх800). Результаты оценивались количественно и признавались положительными, когда значение оптической плотности превышало критическую.

Результаты исследования показали, что почти в трети случаев смерти от острых отравлений героином или при комбинированных отравлениях героином и этиловым спиртом установлен факт ВИЧ-инфицирования.

ВИЧ-инфицирование было установлено в двух случаях смерти от повешений (ранее имелись данные об употреблении данными лицами наркотических препаратов), по одному при смерти от ножевого ранения сердца (убийство), от закрытой черепно-мозговой травмы (убийство), от переохлаждения, алкогольного отравления. Случаи ненасильственной смерти, при которых в крови трупов были выявлены антитела к ВИЧ, имели место в 4 случаях (2 смерть от цирроза печени, 2 - от туберкулеза), причиной смерти одного умершего была хроническая алкогольная интоксикация. Среди всех указанных секционных случаев только в одном имелись сведения о прижизненно диагностированной ВИЧ-инфекции (смерть 58-летней женщины от цирроза печени).

При микроскопическом исследовании у 37,5% умерших ВИЧ- инфицированных лицимелись вирусные гепатиты, в 8,3% - циррозы печени, в 8,3% - лептоменингиты, в 8,3% - хронические пиелонефриты (в том числе 1 в фазе обострения). А в 1 случае диагностирован инфаркт легкого. Алкогольная интоксикация имелась у 70,1% ВИЧ-инфицированных.

Среди ВИЧ-инфицированных наркоманов, частота встречаемости вирусных гепатитов достигала 52,7 % (при этом исключалась смерть от повешений, когда гистологическое исследование не проводилось).

Установление методом иммуноферментного анализа наличия антител к вирусу иммунодефицита человека в образцах жидкой крови и в пятнах сухой крови, полученных из указанных образцов, показало полный параллелизм результатов. Во всех исследованных случаях с прижизненно установленным фактом ВИЧ-инфицирования получен положительный результат при исследовании крови, высушенной на марле.

Исследование архивного материала образцов крови, высушенных на марле, показало, сохраняемость антител в ВИЧ на протяжении не менее, чем 4 лет.

Установлено отсутствие влияния дериватов гемоглобина в образцах сухой крови по результатам исследования с применением тест-системы, предназначенной для работы с плазмой крови.

Обсуждение результатов.

Подтверждена хорошая сохраняемость антител к ВИЧ в сухих пятнах крови и возможность использования для диагностики применяемых в клинических лабораториях тест-систем для определения антител к ВИЧ в плазме крови.

Выводы. 1.

Широкое внедрение в практику бюро судебно-медицинской экспертизы выявления антител к ВИЧ с помощью высокочувствительной методики иммуноферментного анализа позволяет качественно повысить уровень посмертной диагностики, поможет установить картину реальной эпидемиологической обстановки и структуры летальности, информировать органы здравоохранения о выявлении случаев ВИЧ-инфицирования для принятия должных мер санитарно-эпидемиологической защиты и принятия управленческих решений для предотвращения развития эпидемии. 2.

Посмертное выявление вирусных гепатитов и циррозов печени, туберкулеза в обязательном порядке требует проведения обследования на наличие антител к ВИЧ; проведение такого исследования у лиц, употреблявших наркотические препараты должно осуществляться во всех случаях. 3.

Перспективно использование факта выявления антител к ВИЧ в сухих пятнах крови с целью дифференцирования. Представляется возможным применение метода ИФА диагностики ВИЧ-инфекции к выделениям и пятнам выделений, что может позволить оказывать помощь следствию, сужая круг подозреваемых в случаях изнасилований при неизвестных преступниках, а также информировать пострадавших о возможном инфицировании.

Список литературы: 1.

Arya SC. Testing for AIDS on samples of dried blood prepared on filter paper // Vaccine. - 1988.- Jun: 6(3). - P.210. 2.

Strobela E., Emmingerb Ch., Mayerc G., Eberleg J. et al. Detection of HIV-1 Infection in Dried Blood Spots from a 12-Year-Old ABO Bedside Test Card // Vox Sanguinus. - 1998. - Vol. 75..- P..303-305. 3.

Zehner R., Bratzke H., Mebs D. Evaluation of a rapid assay system, HIV 1|YIV 2 Testpack, Abbott, to detect human immunodeficiency virus antibodies in postmortem blood // J Forensic Sci.-1995. - Jan; 40 (1): Р. 113-5.