К ВОПРОСУ О КОНСЕРВАЦИИ АМНИОТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЕЁ В ДЕТСКОЙ ОФТАЛЬМОЛОГИИ

Ташкентский педиатрический медицинский институт

Актуальность. Одним из инструментов регенеративной хирургии является трансплантация тканей как биологический метод стимуляции репара- тивной регенерации (Frank K., 1990; Мулдашев Э.Р., 1994).

и т-ч и

палении вокруг пересаженной ткани. В зависимости от степени этой реакции варьируют и результаты операций с применением трансплантатов. Все вышеизложенное и определяет существующее разнообразие методов пересадки тканей и отсутствие чётких критериев морфологической оценки этих операций.

В последние годы отмечается повышенный интерес офтальмологов к применению в хирургической практике внутренней оболочки плодного мешка человека - амниотической мембраны (АМ). Применение амниотической оболочки в медицине имеет почти столетнюю историю. Амниотическая мембрана может быть использована при разных показаниях как субстрат для заживления повреждённых тканей глаза и как своеобразная «заплатка» (биологическая повязка).

В связи с этим, целью настоящего исследования является поиск наиболее эффективного и оптимального метода консервации АМ для последующего использования её в детской офтальмологической практике.

Материалы и методы исследования. Забор свежей амниотической мембраны производился в стерильных условиях у рожениц на сроке 40 недель гестации, обследованных на СПИД, сифилис, гепатит В, С и TORCH- инфекции.

АМ использовалась при следующих патологиях и повреждениях: проникающие ранения глаза с дефицитом ткани роговицы, ожоги глазного ябло- ка, язвы роговицы, осложнённые десцеметоцеле, и перфорация роговицы при инфекционных, трофических и других кератитах.

Для сравнения нами были применены несколько способов криоконсер- вации АМ: «Свежий» (гипотермическое хранение), замораживание и высушивание заморозкой. В соответствии с одним из методов АМ в стерильных условиях вымывается в балансированном солевом растворе (BSS), затем замачивается в коктейле антимикробной среды в течение 24 часов, после чего производится её вторичная промывка в растворе BSS, после которой амнион отделяется от хориона и разрезается на кусочки приблизительно 2 х 2 см, которые и укладываются стромальной поверхностью вниз на пластинки нитроцеллюлозы. Подготовленная таким образом АМ укладывается в пластмассовый контейнер и хранится в 50% глицерине при температуре - 80°C. Другой вариант отличается тем, что после замачивания АМ хранится в 2% растворе формалина при температуре 40С. Контрольные и экспериментальные кусочки АМ подвергались гистологическому исследованию общепринятыми методами.

Результаты исследования. Результаты наших исследований показали, что при изучении гистологической картины, а также способности трансплантатов к росту in vitro криоконсервированные, а также обработанные и фиксированные в 2% растворе формалина кусочки АМ утрачивали способность к росту, в них отмечалась гибель большого количества клеток.

В связи с этим нами был применён следующий гипотермический метод консервации. Амниотическая оболочка бралась нами за сутки до операции из Республиканского перинатального центра у обследованной родильницы на гестационном сроке 40 недель. Плодная оболочка промывалась и хранилась в стерильном 0,9% растворе Na-хлорида с пенициллином (50.000 ЕД на 100 мл раствора) при температуре -50С. Непосредственно перед использованием контейнер с амниотической оболочкой был разморожен до 18-200С. Затем, амниотическая оболочка аккуратно распределялась на глазной поверхности, обрезалась до необходимых размеров и формы, фиксировалась стромальной стороной к роговице с помощью узловых швов нейлоновой нити 10.0 к лимбу роговицы (на 8 точках соответственно часам). Другой предлагаемый нами метод заключается в том, что после замачивания в физиологическом растворе АМ хранится в 0,05% растворе формалина при температуре -50С.

При гистологическом изучении трансплантатов, консервированных с использованием нашей методики, число погибших клеток было минимальным и гистологическая картина консервированной амниотической ткани ничем не отличалась от ткани свежевзятой амниотической мембраны.

Кроме того, нами было установлено, что АМ одной плаценты для офтальмологических целей хватает на 20-30 трансплантатов.

Выводы: Наиболее предпочтительным для использования в детской офтальмологической практике является гипотермический метод хранения (консервации) амниотической мембраны, и метод фиксирования АМ в слабом (0,05-0,25%) растворе формалина, т.к. не наблюдается статистически достоверных различий в результатах лечения с использованием АМ после такой её консервации по сравнению со «свежим» материалом.