ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕМИНА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С ЦЕЛЬЮ УСТАНОВЛЕНИЯ ПРИЖИЗНЕННОСТИ МЕХАНИЧЕСКИХ ПОВРЕЖДЕНИЙ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ НА ГНИЛОСТНО-ИЗМЕНЕННЫХ ТРУПАХ

Б.Е. Ешмуратов, К.Б. Худайназаров, О.И. Хван, Т.К. Абдураманов Ташкентское городское бюро СМЭ

Актуальность. В последние годы в связи со всерасширяющимся внедрением новых лабораторных методов увеличился диапазон их применения для решения различных экспертных вопросов.

Судебно-следственные органы, учитывая возрастающие возможности судебной медицины, все чаще ставят перед судебно-медицинскими экспертами такие вопросы и требуют их конкретного разрешения.

Наибольшая трудность дифференцировки прижизненных и посмертных повреждений возникает в тех случаях, когда исследование травмы происходит после смерти в различные сроки при явлениях выраженного гниения трупа или воздействия на него каких-либо других факторов внешней среды. Несмотря на многочисленные исследования с использованием современных методов, пока очень мало критериев, пригодных для широкого внедрения их в повседневную практику. При механических повреждениях поджелудочной железы и при исследовании трупа в стадии гнилостного разложения не представляется возможности установить не только прижизненность повреждения, но и даже его наличие. С учетом вышеизложенного проблема в этом направлении все еще остается актуальной.

Нами предпринята попытка достичь некоторого прогресса в решении данной проблемы непосредственного определения гемина в области кровоизлияний в поджелудочной железе методом тонкослойной хроматографии.

Материалы и методы. Для исследования взяты участки ткани поджелудочной железы из области прижизненных повреждений, а также интактной ткани у трупов лиц обоего пола в возрасте от 19 до 63 лет. Из каждого поврежденного и интактного участка готовили по 8 кусочков, 4 из них помещали в отдельности в эксикатор с водой, а остальные 4 подвергали захоронению в почве в течении 15 суток, 1, 2, 3 месяцев.

Методика приготовления проб для исследования методом тонкослойной хроматографии сводилась к следующему: кусочки весом 1 гр.

Полуколичественный анализ гемина проводился путем визуального сравнения окраски зон гемина исследуемых и контрольных объектов с зонами гемина стандартных растворов с известной концентрацией, последние готовили от 0,00195% до 1% из чистого кристаллического гемина в солянокислом ацетоне.

Результаты исследования. Проведенные исследования показали, что полуколичественный анализ гемина выявил различие в содержании его в прижизненных кровоизлияниях поджелудочной железы и интактной ткани при всех изученных сроках пребывания объектов в стоячей воде и почве. В неповрежденной ткани (интактной) сразу после изъятия объектов при хрома- тографическом анализе найдено только лишь следовое количество гемина, а при исследовании через 15 дней, 1, 2, 3 месяца гемин в интактной ткани не найден.

Выводы: 1.

Хроматографическая характеристика, основанная на полуколичественном анализе гемина, позволяет достоверно отличить прижизненные повреждения от контрольных участков неповрежденной ткани. 2.

Полученные нами данные позволяют считать, что хроматографиче- ский метод анализа может быть использован для решения вопроса о прижизненности механических повреждений поджелудочной железы, при исследовании гнилостно-измененных трупов, извлеченных из почвы и воды.

ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ПРИЖИЗНЕННОСТИ ПЕРЕЛОМОВ НА ГНИЛОСТНО- ИЗМЕНЕННЫХ ТРУПАХ

Б.Е. Ешмуратов Ташкентское городское бюро СМЭ

Актуальность.

Особенно сложна диагностика прижизненности, если исследования механических повреждений проводятся на гнилостно-измененных трупах. Известные макро- и микроскопические признаки в таких ситуациях теряют свое диагностическое значение, нередко невозможно использовать и лабораторные методы исследования.

В поисках объективных и достоверных критериев прижизненных повреждений в последние годы разрабатываются более чувствительные лабораторные методы. Внимание многих исследователей привлекают биохимиче- ские, гистохимические, биофизические и спектральные методы исследования, позволяющие улавливать тонкие изменения в травмированных тканях на субклеточном уровне.

Однако высокая чувствительность новых лабораторных методов может и отрицательно влиять на достоверность результатов исследования в связи с индивидуальными особенностями организма, трудно поддающимися объективному учету и оценке. В связи с этим при экспертизе механических повреждений необходимо использовать только комплекс лабораторных методов, взаимодополняющих и подтверждающих друг друга.

С целью определения прижизненности переломов нами изучено количественное содержание гемина в области прижизненных переломов трубчатых костей и интактной ткани в процессе их гнилостного разложения в различных условиях внешней среды: на открытом воздухе, в почве и стоячей воде.

Материалы и методы. Изучению подвергали надкостницу и костный мозг из области прижизненных переломов верхних и нижних конечностей, нанесенных в пределах 6-12 часов до наступления смерти. В каждом случае изучали неповрежденную ткань, взятую рядом с областью переломов. Время наступления смерти во всех случаях было установлено достаточно точно. Весь материал разделили на 3 группы: первую группу составляли объекты, подвергшиеся гниению путем хранения в стеклянных эксикаторах при температуре +18-22оС.

Каждая группа включала ткани, изъятые из 5 трупов; каждый образец исследован сразу после получения материала и через 1, 5, 10, 15, 25, 30, 45, 60 дней. Всего было исследовано 135 объектов травмированной ткани и 135 объектов интактной ткани.

Для исследования кусочки весом 1 гр., из поврежденных и контрольных участков ткани измельчали ножницами и помещали в отдельных пробирках, в которые добавляли по 10 мл солянокислого ацетона. Затем пробирку плотно закрывали притертой пробкой и для экстрагирования ставили в холодильник на 24 часа. После экстракции жидкую часть вытяжки переливали через бумажный фильтр в другие градуированные пробирки, и объем доводили при помощи солянокислого ацетона до 10 мл.

Количественное определение гемина в исследуемых объектах осуществляли с помощью спектрофотометра СФ-16. Измерение оптической плотности окрашенных растворов производили в ультрафиолетовых лучах при длине волны 381 нм. Количество гемина в исследуемых объектах вычисляли по калибровочному графику, построенному по стандартному раствору гемина. Полученные результаты подвергали статистической обработке по вариационному ряду. Результаты исследования. Количественный анализ гемина выявил различие содержания его в прижизненных переломах и интактной ткани при всех изученных сроках пребывания объектов на открытом воздухе, в почве и стоячей воде.

При сопоставлении средних показателей прижизненно травмированной и интактной ткани были получены статистические высоко достоверные различия (Р<0,001) при всех изученных сроках пребывания объектов на открытом воздухе, в почве и стоячей воде.

Выводы. Таким образом, количественное определение гемина методом спектрофотометрии позволяет не только диагностировать наличие повреждений, но и отличить их прижизненность на гнилостно-измененных объектах.