ОБНАРУЖЕНИЕ ФИНЛЕПСИНА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ

М.М.Шахитов, М.М.Ибрагимова, Л.Т.Икрамов

Ташкентское городское бюро СМЭ

Актуальность. Широкое применение препарата финлепсин, применяемого при лечении эпилепсии и невралгии тройничного нерва, иногда ста- новится причиной острых отравлений, так как, несмотря на то, что препарат хорошо переносится, при длительном и неправильном применении он может быть токсичным.

Цель исследования: обнаружение препарата финлепсина во внутренних органах трупа при судебно -химическом исследовании.

Материалы и методы.

Изолирование финлепсина проводили следующим образом: 100 г мел- коизмельченного органа заливали 200 мл дистиллированной воды, подкисляли насыщенным раствором щавелевой кислоты до рН 2 по универсальному индикатору и настаивали при комнатной температуре в течение 2 ч при периодическом перемешивании. Водное извлечение отделяли от твердой части объекта, процеживали через двойной слой марли. Полученное кислое водное извлечение экстрагировали хлороформом трижды по 15 мл. Экстракты объединяли и испаряли до объема 5 мл и исследовали следующими реакциями: 1) при испарении нескольких капель хлороформного экстракта на предметном стекле наблюдали микрокристаллы в виде палочек и иголок (чувствительность реакции 0,1 мкг); 2) к остатку, полученному после испарения десяти капель хлороформного экстракта, добавляли 10 капель концентрированной азотной кислоты и выпаривали досуха на кипящей водяной бане. Остаток раза обрабатывали концентрированной азотной кислотой порциями по 10 капель и вновь выпаривали на бане досуха. К охлажденному остатку прибавляли 2 капли 10% спиртового раствора едкого натра, при этом образовывалось фиолетовое окрашивание (чувствительность реакции 3 мкг); 3) тонкослойную хроматографию проводили на пластинках размерами 9x12 см, с закрепленным слоем силикагеля КСК.

Результаты исследования. Обнаружение финлепсина методом ПИ/МС позволяет анализировать его в экстрактах с высокой чувствительностью по сравнению с традиционными методами приблизительно в 100 раз.

Выводы. Использование вышеуказанных методов позволяет легко и безошибочно обнаруживать финлепсин в биообъектах, что повышает доказательную ценность судебно-химических исследований при диагностике отравлений данным препаратом.

ОБ ИЗОЛИРОВАНИИ ТОКСИНОВ ГРИБОВ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКОГО

МАТЕРИАЛА

Р.М.Слесарева, М.М.Шахитов

Ташкентское городское бюро СМЭ

Актуальность.

Цель исследования: разработка методов изолирования грибных токсинов из биологических объектов и их идентификация.

Материалы и методы исследования. Ядовитость грибов по отношению к организму человека и теплокровных животных объясняется наличием в них разнообразных токсинов, которые относятся к различным классам химических соединений. Так, например, аманитины и фаллоидины, псилоцибин и псилоцин, являясь производными индола с различными функциональными группами, имеют определенную температуру плавления, хорошо растворимы в воде, этиловом спирте, органических растворителях (хлороформе), а также гемолизин, являясь производным фенолкарбоновой кислоты, обладает такой же растворимостью. Учитывая литературные данные о физико-химических свойствах токсинов грибов, мы пришли к выводу, что целесообразно проводить извлечение либо 960 этанолом, либо смесью вода-этанол (1:1) с последующей экстракцией хлороформом.

Изолирование грибных ядов из биологического объекта проводили следующим образом: 100 г мелкоизмельченного желудка с содержимым заливали 960 этанолом до полного покрытия объекта. Смесь оставляли на 2 ч при частом перемешивании, фильтровали. Фильтрат переносили в делительную воронку, к которому добавляли такое же количество воды, после чего экстрагировали хлороформом (50 мл). Хлороформный слой отделяли и к нему добавляли 2 мл концентрированной соляной кислоты. Полученную смесь выпаривали на водяной бане до сухого остатка, который затем растворяли в 20 мл дистиллированной воды и фильтровали. Фильтрат переносили в дели- тельную воронку и экстрагировали равным количеством смеси хлороформ- этанол (4:1). Слой органического растворителя отделяли и упаривали при комнатной температуре до объема 5 мл и исследовали качественными реакциями.

Образцы сравнения (стандарты) для идентификации токсинов грибов приготавливали следующим образом: по 5 г измельченных частей трех разновидностей грибов заливали 50 мл этанола каждую, растирали в ступке и жидкую часть отфильтровывали.

Для идентификации токсинов грибов использовали реакции окрашивания и метод тонкослойной хроматографии (ТСХ).

Результаты исследования. Изложенный метод изолирования токсинов из грибов и биологических объектов при отравлениях грибами является доступным и результативным для судебно-химического анализа, а также положительно влияет на обнаружение их вышеуказанными качественными реакциями.

Выводы: на практике целесообразнее использовать предложенный метод изолирования токсинов грибов из биологического объекта, основанный на настаивании его этиловым спиртом без подкисления.