ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭТАКРИНОВОЙ КИСЛОТЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
М.И.Алиходжаева, М.О.Рихсибаева, М.А.Таджиев
Ташкентский фармацевтический институт
Актуальность исследования. Этакриновая кислота (Урегит) - является сильным диуретическим средством.
Применяют при отеках у больных с недостаточностью кровообращения, при отеках почечного происхождения и др. В литературе описывается побочное и токсическое действие этакриновой кислоты. Его использование может сопровождаться развитием гипокалиемии и гипохлоремического алкалоза. В связи с этим, изучение этакриновой кислоты в химико-токсикологическом отношении является актуальной задачей.Материалы и методы. Этакриновая кислота выделялась из крови следующим образом: к крови прибавляют насыщенный раствора натрия хлорида и подкисляют концентрированной соляной кислотой до рН 2,0-3,0. Затем трижды экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические извлечения упаривают и полученный сухой остаток растворяют в этаноле. Эта- ноловый раствор подвергают качественному и количественному анализу методами ТСХ и УФ-спектроскопии. Для хроматографирования в тонком слое используют систему растворителей хлороформ-бензол-2-пропанол (2:4:1) и, в качестве проявителей, УФ-облучение при 254 нм и 1% раствор калия пер- манганата.
Количественное содержание этакриновой кислоты, выделенной из биологической жидкости, определяли на спектрофотометре Agilent при 278 нм, используя в качестве растворителя этанол.
Для выделения этакриновой кислоты из мочи поступали следующим образом: модельную смесь биологической жидкости, содержащую определенное количество этакриновой кислоты, помещали в коническую колбу объемом 50 мл, прибавляли 2 г натрия хлорида и перемешивали до полного растворения. Добавляют 0,2 н раствора соляной кислоты для создания рН 2,0-3,0 и трижды экстрагировали диэтиловым эфиром. Эфирные извлечения объединяли и органический растворитель отгоняли.
Сухой остаток растворяли в этаноле и проводили анализ, как указано выше.Результаты исследования. Результаты проведённого нами исследования показали, что предложенные методики изолирования этакриновой кислоты из биологических жидкостей позволяют экстрагировать её из крови в количестве 74,5%, а также из модельной смеси мочи в количестве 81,7%.
Выводы. Разработаны методы изолирования этакриновой кислоты из крови и мочи. В извлечениях этакриновая кислота определена методами ТСХ и УФ спектрофотометрии. Предлагаемые методы определения этакриновой кислоты в биологических жидкостях (крови и мочи) могут быть использованы при судебно-химической экспертизе в случаях отравления этим препаратом.
ОБНАРУЖЕНИЕ НОВОКАИНА И ПАРА-АМИНОБЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ МЕТОДОМ УФ-СПЕКТРОСКОПИИ
З.К.Садыков, И.Г.Ахмеджанов, Л.Т. Икрамов Ташкентский фармацевтический институт Главное бюро СМЭ
Актуальность. Одной из проблем химико-токсикологического анализа является изолирование, обнаружение и определение ядовитых и сильнодействующих веществ при исследовании внутренних органов и биологических жидкостей.
Поскольку при отравлениях новокаином морфологические и гистологические изменения внутренних органов нехарактерны, для диагностики отравлений решающее значение имеют результаты идентификации и количественного определения новокаина и его метаболитов - ПАБК и диэтиламино- этанола - в органах человека.
Учитывая широкое применение новокаина в медицинской практике и возможную токсичность для людей, а также недостаточно полную разработку методов его выделения, идентификации и количественного определения в объектах биологического происхождения, изучение новокаина и его метаболитов (ПАБК и диэтиламиноэтанола) в химико-токсикологическом отношении является одной из актуальных задач современной токсикологической (судебной) химии.
Спектроскопия в УФ-области спектра получила широкое распространение в анализе различных органических веществ благодаря высокой чувствительности, надежности, простоте и доступности. В литературных источниках имеются сведения в ряде случаев недостаточные, а иногда и противоречивые, о максимумах светопоглощения этанольных растворов новокаина и ПАБК и о значениях их удельных коэффициентов светопоглощения.
По некоторым данным удельный коэффициент светопоглощения этанольного раствора новокаина при длине волны 300 нм равен 800, при 225 нм - 230. Удельный коэффициент светопоглощения этанольного раствора ПАБК при длине волны 290 нм равен 1200, при 221 нм - 540. В других источниках указано значение удельного коэффициента светопоглощения этанольного раствора ПАБК лишь при длине волны 290 нм, равное 1260.В связи с этим мы поставили перед собой задачу проверить данные, приведенные в литературе, по максимумам светопоглощения новокаина и ПАБК в различных растворителях, а также сведения о величине удельного коэффициента светопоглощения и, исходя из полученных результатов, предложить методику обнаружения и количественного определения новокаина и ПАБК в биологическом материале методом УФ-спектроскопии.
Материалы и методы. Мы снимали спектры поглощения новокаина и ПАБК в различных растворителях, используя спектрофотометр СФ-46, в диапазоне длин волн 210-320 нм в кюветах с рабочей длиной 1 см. В качестве раствора сравнения служил чистый растворитель.
Для новокаина и ПАБК использовали следующие растворители: дистиллированная вода, 0,1 н раствор соляной кислоты, этанол. При снятии спектров поглощения новокаина было установлено, что этанольный раствор новокаина имеет два максимума светопоглощения при длинах волн 221 и 295 нм, водный раствор - два максимума при длинах волн 221 и 291 нм, а раствор в 0,1 н соляной кислоте - два максимума светопоглощения при длинах волн 225 и 270 нм.
Результаты исследования. Изучение спектра поглощения ПАБК в различных растворителях показало, что этанольный раствор имеет два максимума поглощения при длинах волн 222 нм, водный раствор - один максимум светопоглощения при длине волны 265 нм, а раствор в 0,1 н соляной кислоте имеет два максимума поглощения при длинах волн 225 и 270 нм.
Выводы. Таким образом, в результате проведенного исследования мы выяснили, что для химико-токсикологического исследования новокаина и ПАБК при анализе различных объектов могут быть использованы спектральные характеристики обоих веществ, значения максимумов поглощения которых в УФ-области спектра значительно различаются в испытанных растворителях. Для количественного определения, исходя из полученных данных, целесообразно проводить УФ-спектрофотометрию для новокаина при длине волны 295 нм и для ПАБК - при 290 нм. При этих длинах волн наблюдается наибольшее молярное поглощение (23502,6 для новокаина, 17469,60 - для ПАБК).