ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ

а) Имеются ли следы крови на вещественных доказательствах?

б) Принадлежит кровь человеку или какому-либо животному?

в) Если кровь принадлежит человеку, то какова ее групповая принадлежность?

г) Какова половая принадлежность крови?

д) Каково региональное происхождение крови?

е) Принадлежит кровь взрослому человеку или плоду?

Далеко не всегда пятна, подозрительные на следы крови, выявляются на вещественных доказательствах при осмотре невооруженным глазом.

Таким образом, исследование в ультрафиолетовых лучах является о р и си тш р о в оч ной реакцией на кровь. Такими же по значимости будут химические пробы на ферменты (пе- роксидазу, каталазу), содержащиеся в крови. Однако производить эти пробы ие рекомендуется, т. к. они связаны с нежелательным воздействием на пятна химических реактивов и расходованием материала, подлежащего исследованию, и в то же время являются неспецифичными, т.

О наличии крови в пятне свидетельствуют лишь форменные элементы, а также гемоглобин или его производные. В современных условиях обычно применяют абсорбционную спектроскопию с целью обнаружения характерных спектров производных гемоглобина—ггемохромогена (восстановленного гематина) или гематопорфирина (в старых пятнах). При отсутствии спектроскопа производят микрокристаллические реакции—получение соляно-кислого гемина (кристаллов коричневого цвета в виде косых параллелограммов) или гемо- хромогена (красные игольчатые кристаллы).

В и д о в а я принадлежность крови может быть установлена разными способами. Наиболее распространенными являются иммунологические методики, в частности,—реакция преципитации. Эта реакция была открыта в 1899 году Ф. Я. Чистовичем, и впервые применена в судебной медицине для определения видовой принадлежности крови в 1901 году Уленгутом.

Принцип ее заключается в том, что организм животного в ответ на введение чужеродного белка (антигена), т. е. на (иммунизацию, вырабатывает антитела—преципитины. Сыво- ротка крови этого животного становится иммунной прецигш- тирующей. При взаимодействии ее с нормальной сывороткой животного, белком которого производили иммунизацию, вы- о ад а е т ос а до к—in р ецигі и т а т. С н о р м а л ы і ым и с ы в о рот к а м и животных других видов преципитат не образуется. Поэтому, располагая сыворотками, преципитирующими бел ки различных животных (набор таких сывороток имеется в каждой лаборатории), можно путем апробации этими сыворотками неизвестной крови определить ее видовую принадлежность.

Кстати следует заметить, что с помощью реакции преципитации в судебно-медицинской практике устанавливается видовая принадлежность не только крови, но и иных объектов животного происхождения, содержащих белок—слюны, пота, изолированных клеток, а также кусочков различных органов и тканей и др.

Преципитирующие сыворотки обычно готовят путем иммунизации кроликов соответствующим белкам (на белок кролика или зайца—путем иммунизации кур, коз или иных животных). Таким образом, получают сыворотки, способные осаждать белки разных видов (человека, лошади, свиньи, кошки, собаки, рогатого скота—крупного и мелкого и др.).

Реакция преципитации может проводиться в двух вариантах: в жидкой среде и геле (в зависимости от количества исследуемого материала, объема и мутности вытяжек из пятен и др. условий). В настоящее время активно внедряется в практику высокочувствительный и быстрый метод электро- нреципитации или встречного иммуноэлектрофореза, представляющий собой комбинацию реакции преципитации в геле и электрофореза.

Изучается также возможность определения видовой принадлежности крови и иных объектов животного происхождения другими методами: с помощью иммупофлуоресцеиции (метод флуоресцирующих антител), используемой в различных областях биологии и медицины, путем эмиссионного спектрального анализа, представляющего особый интерес в случаях денатурации белка (напр., при воздействии высокой температуры) и др. Широкого применения в экспертной практике эти методы пока не получили, хотя некоторые из них, по-видимому, являются перспективными.

С целью установления возможного происхождения следов крови от конкретного лица важно определить ее груп- п о в у ю принадлежность.

Известно, что в крови каждого человека содержатся ан- пи гены эритроцитарных, лейкоцитарных, сывороточных и ферментных систем, передающиеся по наследству. Сочетание антигенов образует в каждой системе группу крови.

Наиболее изучены и прежде всего исследуются эритро- цитарные системы, а из них—система АВО. Кроме антигенов О(Н), А и В, содержащихся в эритроцитах, в эту систему •входят агглютинины а и (3, находящиеся в сыворотке.

Установление групповой принадлежности крови в пятнах складывается из раздельного выявления антигенов (агглюти- ногенов) и агглютининов.

Определение антигенов основано на явлении абсорбции, т. е. на способности их при контакте с соответствующими реагентами извлекать специфические антитела. Результаты абсорбции выявляются реакцией гемагглютинации.

Наряду с классическим (методом—реакцией абсорбции агглютининов (в количественной модификации) в последние годы стали применяться методы абсорбции-элюции и «смешанной» агглютинации. Существенным преимуществом их является незначительное количество (объем) материала, необходимого для исследования: из пятен крови берут лишь отдельные ниточки длиной 0,5—0,6 см или кусочки размерами 0,2x0,2 см (А. К. Туманов, 1975).

Агглютинины обычно определяют методом покровного стекла по Ляттесу, основанным на извлечении из пятна крови агглютининов во взвеси стандартных эритроцитов групп А и В. Агглютинация тех или иных стандартных эритроцитов свидетельствует о присутствии в исследуемом пятне опр еде - л е ни ых а гг л юти ви нов.

При совпадении групп крови подозреваемого и потерпевшего по системе АВО прибегают к дифференциации антигенов других изоеерологичееких систем—эритроцитарных, сывороточных и ферментных (таблицы 1, 2, 3).

Из эритроцитарных систем в настоящее (время в кровяных пятнах широко исследуются Р, Лыоис, антиген Д системы Rh. Имеются реальные предпосылки для определения системы MNSs и др.

Из сывороточных систем изучаются гаптоглобин, Gm, Ge, из ферментных—кислая фосфатаза эритроцитов, фосфоглю- комутаза (ФГМ), аденилаткипаза.

Совершенно очевидно, что чем больше антигенов различных систем будет выявлено в кровяном пятне, тем больше оснований будет получено для вывода об индивидуальной принадлежности крови, т. к. установленная совокупность факто- ров окажется неповторимой, т. е. свойственной только одном/ человеку. В этом аспекте представляют интерес и лейкоцитарные антигены (система HZ—А), пока еще не применяемые в су неб но -мед ициноко й п р а к тике.

В настоящее время, когда исследуется еще сравнительно небольшое количество систем крови, можно или исключи: ть происхождение ее от определенного лица (по ОДНОЙ илл нескольким системам), или высказать суждение о том, чт ? кровь м о г л а принадлежать этому лицу.

Отмеченная антигенная характеристика крови с учетом изученных законов наследования кровяных факторов состав- лг-_т основу экспертизы крови в делах о спорном отцовстве, ?материнстве .и замене детей. При формулировке вывода исходят из того факта, что у ребенка могут быть только те антигены н изоферменты, которые присутствуют либо у обои* родителей, либо у ОДНОГО ИЗ 'НИХ, и что если у ребенка имеется а: тиген или изофермент, отсутствующий у матери и у пред- ^слагаемого отца (или, наоборот, у отца и предполагаемой матери), то такой мужчина исключается как отец данного ребенка (или исключается женщина как мать).

Гр-н К. отрицал свое отцовство по отношению к 8-месячному мальчику Виктору.

В процессе двух, проведенных одна на другой, судебнснмедицин- ских экспертиз у ребенка, его матери и гр-на К. исследовались и;ю- серолоігические системы ABC), MNSs. Р, Rh " категория вы де лите льет в а (см. ниже). По этим системам отцовство не исключалось.

Третья экспертиза, выполненная в .научно-исследовательском институте МЗ СССР, была более расширенной. При использовании дифференцирующих сывороток различных систем установлены следующие групповые характеристики:

мать: В, N, Fy(a + ), р(Р-), k(K—). Gm(abx-), Le(a—b+> и антигены С, Д, е системы резус.

Предполагаемый отец: A, MN. Fy(a I-), k(K—), Gm(a—х—J Le(a—b + ) и антигены с и е системы резус.

Ребенок: A3, MN, р(Р-), Fy(a + ), k(K—), Cim(a+x—),

Le (а + в—) и антигены С, Cw, Д, е системы резус.

Таким о-бразом, наличие в крови ребенка антигена С , при от* .еутствии его в крови матери и предполагаемого отца позволило категорически исключить отцовство гр-на К. в отношении мальчика Виктора.

Как и относительно происхождения крови в пятнах на вещественных доказательствах от определенного лица, при экспертизе отцовства можно исключить, например, конкретного мужчину как отца ребенка, но нельзя сделать вывод о том, что мужчина является отцом ребенка. Это объясняется тем» что отмеченную групповую характеристику крови (в пределах: исследованных систем) может иметь любой другой мужчина, а .не только предполагаемый отец ребенка.

Довольно надежный путь определения отцовства (ил.ш материнства) открывается при дополнительном использовании математических расчетов, основанных па теории вероятности. Разработаны специальные таблицы для вычисление процента вероятности отцовства на основании результатов исследования крови матери, ребенка и ответчика (предполагаемого отца). Метод используется в экспертной практике ряда> стран (ГДР, ФРГ, Польша и др.).

Если потерпевший и подозреваемый разного пола, то исключить вероятность происхождения крови в пятнах на вещественных доказательствах от одного из них можно путем определения п о л о в о й принадлежности крови.

Точные методы установления полового происхождения крови и других объектов судебно-медицинской экспертизы без. выраженных признаков анатомического пола (например, изолированных клеток или кусочков органов и тканей расчлененных, скелетированных или обугленных трупов и т. д.) были разработаны после того, как в 1949 году Вагг и Bertram констатировали половой диморфизм тканей. Он обусловлен различным набором половых хромосом у женщин (XX) »? мужчин (XY).

В 31—77% ядер женских тканей содержится характерна» для иола глыбка—Х-хроматин (тельце Барра) величиной т? 1 мк, состоящая из ДНК- В мужских тканях Х-хроматин или вообще не обнаруживается или отмечается пе более, чем з< 10—14% ядер.

Выявляется Х-хроматин при окраске ядер основными красителями (по Фельгену), толуиднновым голубым по До- кумову и др.).

В 1968 г. Caspersson была разработана методика выявления мужского полового хроматина (У-хроматина), а в 1970 ! P. L. Pearson доказал возможность дна гностики пола человека по содержанию У-хроматина в соматических клетках. Установлено, что в мужских клетках У-хроматин встречается із 22—100% ядер, в женских—в 1—-2%. Он четко выявляется при люминесцентной микроскопии препаратов, окрашенных атебрином или акрихин-ипритом.

В крови половые различия отмечаются в ядрах лейкоцитов. В 1954 году Davidson et Smith впервые обнаружили в нейтрофилах женской крови характерные ядерные отросткй диаметром около 1 мк, обозначенные авторами как барабанные палочки. Они выявляются при окраске мазков по Рома- новекому—Гимза, Фельгену и др. красителями. Davidson et Smith , а также другие исследователи (Briggs, Cup-

nermann, 1957; Murthy, Haam, 1958; Т. В. Матвейчук, 1958; А. Коссаковский ;и Р. Гжелен, 1959; Б. С. Лакиза, 1968 л др.) считают, что барабанные палочки свойственны сегманто- ядерным нейтрофилам только женской крови. По данным других авторов (Cosenow, Scupin, 1956; Caratzali, Phleps, Turpin, 1957; А. В. Капустин, 1969 и др.)» они встречаются и у мужчин, однако значительно реже, чем у женщин. Так, А. В. Капустин указывает, что у женщин барабанные палочки содержатся в количестве 5—42, а у мужчин—0—3 на 500 .лейкоцитов.

Кроме барабанных палочек (отростков типа А) в нейтро- филах отмечены и другие специфические для пола отростки—? узелки (отростки типа Б). Установлено, что частота обнаружения их у женщин 17—42, у мужчин—0—9 на 500 лейкоцитов (А. В. Капустин, 1959).

Другие отростки ядер нейтрофилов (ракетки, маленькие дубинки и пр.) половой специфичностью не обладают.

Содержание Y-хроматина в разных клетках белой крови примерно такое же, как и в соматических клетках.

Примечания: 1. В случаях аномалий хромосомного набора (например, при синдромах Шерешевского—Тернера и Клайнфельтера) у женщин и мужчин содержание клеточных ядер с Х- и Y-хроматином может быть свойственно противоположному иолу. Это следует иметь в виду при оценке результатов цитологического изучения объектов судебно-медицинской экспертизы с целью определения пола.

2. Исследования по установлению процентного содержания ядер с Х- и Y-хроматином производятся также при определении пола субъектов в случаях неправильного полового развития (интерсексуальные состояния). Объектами изучения при этом являются буккальные или вагинальные мазки, а также кровь (у живых лиц), мазки-отпечатки или кусочки органов и тканей (у трупов).

Иногда возникает необходимость в определении per ио- нального происхождения крови. Обычно это касается менструальной крови (напр., при половых преступлениях). В отдельных случаях требуется высказать суждение о возможном носовом кровотечении, о происхождении крови из более глубоких дыхательных путей или легкого, из желудка, прямой кишки.

Основным методом исследования является морфологический или цитологический, предусматривающий обнаружение в кровяных следах клеточных элементов определенного органа (напр., эпителия слизистой матки, влагалища, дыхательных путей и др.)- Для установления менструального происхождения крови, кроме того, предложен ряд методик, среди ^которых, по мнению А. К- Туманова, заслуживает внимания электрофоретическое определение фибринолитической актив- зі ост и менструальной крови (Gulliford, 1959; М. Б. Табакман; 1963). Исследованию могут подвергаться насыщенные кровью пятна без примеси выделений спермы, слюны и др. Вопрос о принадлежности крови взрослому человеку или плоду (новорожденному ребенку) возникает при расследовании уголовных дел об убийстве новорожденных детей, прежде всего—о детоубийстве, т. е. убийстве .новорожденного ребенка матерью. Основанием для положительного ответа является обнаружение в кровяных пятнах свойственного крови плодов фетального гемоглобина (HbFe). В пуповишюн «крови доношенного плода содержание его составляет 70—80%, к концу ^первого года жизни ребенка не превышает 1—4%, т. е. уровня, характерного для крови взрослого человека (Г. М. Корень, 1967; Э. М. Семенчева, 1970).

HbFe отличается от гемоглобина крови взрослого человека (НЬА) физико-химическими, биохимическими, иммунологическими и др. свойствами. В частности HbFe характеризует высокая резистентность к щелочам, что и используется в качестве реакции для его выявления (определение скорости щелочной денатурации). Установлено, однако, что достоверные результаты могут быть получены лишь при исследовании свежих пятен крови (до трех месяцев, В. А. Шевчуік, 1972), т. к. со временем количество фетального гемоглобина в них снижается.

Кроме разрешения проанализированных вопросов, при судебно-медицинском исследовании пятен крови, в зависимости от особенностей конкретного дела, иногда требуется установить и ряд других экспертных -положений. Так, необходимо бывает определить механизм образования кровяных следов. Суждение по этому поводу базируется на комплексных данных, полученных при изучении формы, размеров и локализации следов на вещественных доказательствах с одной стороны, морфологических и прочих особенностей конкретной травмы—с другой. Поэтому вопрос обычно разрешается или в физико-техническом отделении судебно-медицинской лаборатории, куда направляются соответствующие объекты, или экспертом, производящим исследование повреждений.

Может возникнуть надобность в определении к о л и ч е- с тв а жидкой к р о в и, необходимой для образования конкретного пятна (пятен) на вещественных доказательствах. Точных методов разрешения этого вопроса не существует. Ориентировочное значение могут иметь данные, полученные при определении сухого остатка крови в пятне с последующим перерасчетом на количество жидкой крови (исходя из того, что 1000 мл жидкой крови в среднем соответствуют 211 г сухого остатка). Масса сухого остатка устанавливается или путем (вычитания разности в ;весе равных по площади участков пятен и чистого предмета-носителя или путем извлечения крови из пятна слабым раствором едкой щелочи и аммиака.

Во многих случаях важно было бы высказать суждение о д а в н о с т и в о з н и к н о в е :н и я к р о в я и ы х следов. К сожалению, достоверный вывод по этому поводу также сделать пока нельзя, т. е. те изменения, которые претерпевает излившаяся из сосуда кровь и которые -могут быть зарегистрированы теми или иными методами, зависят не только от времени образования пятна, но и от комплексного влияния различных внешних факторов. Учесть же это влияние можно далеко не всегда, т. к. оно связано с условиями содержания вещественных доказательств, выяснить которые часто не удается.

При расследовании некоторых дел об убийствах, криминальном аборте или детоубийстве, а также о половых преступлениях, может возникнуть необходимость установления происхождения крови от беременной женщины. Это можно доказать выявлением в пятнах (гормона беременности —хор ионического гонадотропина. Известные биологические реакции (в частности, проба Ашгейм-Цондека) с этой целью не применяются, т. к. проведение их трудоемко, связано с содержанием в лабораториях животных и в силу ряда иных причин. Более перспективными являются иммунологические методики, основанные на наличии у хорионгонадотропи- <на антигенных свойств. Для их определения рекомендуется использовать применяемые в акушерской практике иммунологические системы «Гравидиагностикум» и «Гравимун».

Точность этого метода оценивается разными авторами б пределах 79—100%. Вместе с тем установлено влияние на сохранность хорионгонадотропина в пятнах крови (и мочи) фактора времени и различных внешних условий. Отмечено,, что четкие результаты могут быть получены с пятнами давностью до 20—30 дней и что хранение пятен при температуре свыше 30° резко снижает возможность выявления в них гормона, а при 60° он разрушается (А. К. Туманов, 1975).

С целью определения факта беременности и родов А. С, Гладких (1970) предлагает исследовать содержащийся в крови фермент — лейцинаминопептидазу. По данным автора, электрофоретически в сыворотке крови женщин, начиная с 8—10 недель беременности, обнаруживается добавочная фракция этого фермента. В дальнейшем интенсивность ее возрастает, достигая максимума в последние дни беременности и во время родов. В послеродовом периоде добавочную фрак- дню можно выявить спустя 3 недели, затем выраженность ее снижается. Лейцинаминопептидаза отчетливо определяется в

пятнах крови давностью до 50 дней.